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熒光探針定量PCR檢測(cè)結(jié)核分歧桿菌DNA
2015-09-24 16:37:35  來(lái)自:天津市第三中心醫(yī)院

  結(jié)核病是由結(jié)核分歧桿菌引起的慢性傳染病,可侵及許多臟器,,以肺部受累形成肺結(jié)核為常見(jiàn),。排菌者為其重要的傳染源。人體感染結(jié)核菌后不一定發(fā)病,,當(dāng)?shù)挚沽档突蚣?xì)胞介導(dǎo)的變態(tài)反應(yīng)增高時(shí),,才可能引起臨床發(fā)病。

  目前,,在全球范圍內(nèi),,由于耐藥結(jié)核菌的產(chǎn)生與擴(kuò)展,結(jié)核菌和人體免疫缺陷病毒(HIV)的雙重感染,,人口的流動(dòng)性大,,及許多國(guó)家結(jié)核病的檢查治療不完善等原因,使全球結(jié)核病呈上升趨勢(shì),,且發(fā)病人數(shù)急劇增加,,全世界每年新發(fā)約900萬(wàn)結(jié)核病人,而每年死于結(jié)核病得人數(shù)達(dá)300萬(wàn),。而我國(guó)的結(jié)核病疫情亦相當(dāng)嚴(yán)重,,全國(guó)感染結(jié)核病人近3億,因此盡早的發(fā)現(xiàn)新病人,、控制傳染源便顯得尤為重要,。

  目前結(jié)核病的臨床診斷主要依靠病史、胸片,、痰涂片,、痰結(jié)核菌培養(yǎng)、PPD實(shí)驗(yàn)等方法,,雖然這些方法有其優(yōu)點(diǎn),,但陽(yáng)性率低、耗時(shí)長(zhǎng),、操作繁瑣,、影響因素多、不易標(biāo)準(zhǔn)化等原因,,為結(jié)核病的診斷,、預(yù)防和治療帶來(lái)了困擾。因此盡快找到一種快速而簡(jiǎn)單的結(jié)核病診斷方法尤為重要,。

  天津市第三中心醫(yī)院呼吸科近年來(lái)采用了應(yīng)用熒光探針定量PCR檢測(cè)結(jié)核分歧桿菌DNA的方法用于結(jié)核病人的早期診斷,,傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)較為費(fèi)時(shí),結(jié)核菌培養(yǎng)需要4-8周,應(yīng)用PCR檢測(cè)結(jié)核菌DNA只需1-2天,,該方法不但解決了常規(guī)方法培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng),、標(biāo)本污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性、不能準(zhǔn)確定量等問(wèn)題,,而且具有區(qū)分結(jié)核分歧桿菌與其他分歧桿菌,、提高結(jié)核分歧桿菌的陽(yáng)性檢出率等優(yōu)點(diǎn)。檢出結(jié)核桿菌的陽(yáng)性率顯著高于痰涂片抗酸染色和改良羅氏培養(yǎng)法等方法,。同時(shí)該方法可用于不同感染部位的標(biāo)本,,如痰、支氣管灌洗液,、血液,、腦脊液、宮頸拭子,、尿液,、胸腹水等均可,起到盡早確診,、減少傳染源的作用,。

  雖然PCR檢測(cè)結(jié)核菌DNA的方法較傳統(tǒng)方法對(duì)于結(jié)核病的盡早確診有了明顯的提高,但該方法仍存在一定的局限性,,主要表現(xiàn)為假陽(yáng)性反應(yīng),,主要原因有以下幾點(diǎn):(1)痰液標(biāo)本成分復(fù)雜,可能存在某種物質(zhì)干擾酶促反應(yīng)(2)結(jié)核分歧桿菌DNA提取純化方法復(fù)雜而影響其敏感性(2)實(shí)驗(yàn)室污染可能影響特異性,。

  因此,,在結(jié)核病的診斷上,雖然檢測(cè)結(jié)核菌DNA的方法仍存在一定局限性,,但檢測(cè)時(shí)間短,,與其他傳統(tǒng)方法結(jié)合可明顯提高檢測(cè)的敏感性和特異性,為結(jié)核病的盡早確診提供了一種有效,、可行,、簡(jiǎn)便的方法。

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