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    熒光探針定量PCR檢測結(jié)核分歧桿菌DNA
    2015-09-24 16:37:13  來自:天津市第三中心醫(yī)院

      結(jié)核病是由結(jié)核分歧桿菌引起的慢性傳染病,,可侵及許多臟器,以肺部受累形成肺結(jié)核為常見,。排菌者為其重要的傳染源,。人體感染結(jié)核菌后不一定發(fā)病,當(dāng)?shù)挚沽档突蚣?xì)胞介導(dǎo)的變態(tài)反應(yīng)增高時,,才可能引起臨床發(fā)病,。

      目前,在全球范圍內(nèi),,由于耐藥結(jié)核菌的產(chǎn)生與擴(kuò)展,,結(jié)核菌和人體免疫缺陷病毒(HIV)的雙重感染,人口的流動性大,,及許多國家結(jié)核病的檢查治療不完善等原因,,使全球結(jié)核病呈上升趨勢,且發(fā)病人數(shù)急劇增加,,全世界每年新發(fā)約900萬結(jié)核病人,,而每年死于結(jié)核病得人數(shù)達(dá)300萬。而我國的結(jié)核病疫情亦相當(dāng)嚴(yán)重,,全國感染結(jié)核病人近3億,,因此盡早的發(fā)現(xiàn)新病人,、控制傳染源便顯得尤為重要。

      目前結(jié)核病的臨床診斷主要依靠病史,、胸片,、痰涂片、痰結(jié)核菌培養(yǎng),、PPD實驗等方法,,雖然這些方法有其優(yōu)點,但陽性率低,、耗時長,、操作繁瑣、影響因素多,、不易標(biāo)準(zhǔn)化等原因,,為結(jié)核病的診斷、預(yù)防和治療帶來了困擾,。因此盡快找到一種快速而簡單的結(jié)核病診斷方法尤為重要,。

      天津市第三中心醫(yī)院呼吸科近年來采用了應(yīng)用熒光探針定量PCR檢測結(jié)核分歧桿菌DNA的方法用于結(jié)核病人的早期診斷,傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)較為費時,,結(jié)核菌培養(yǎng)需要4-8周,,應(yīng)用PCR檢測結(jié)核菌DNA只需1-2天,該方法不但解決了常規(guī)方法培養(yǎng)時間長,、標(biāo)本污染導(dǎo)致的假陽性,、不能準(zhǔn)確定量等問題,而且具有區(qū)分結(jié)核分歧桿菌與其他分歧桿菌,、提高結(jié)核分歧桿菌的陽性檢出率等優(yōu)點,。檢出結(jié)核桿菌的陽性率顯著高于痰涂片抗酸染色和改良羅氏培養(yǎng)法等方法。同時該方法可用于不同感染部位的標(biāo)本,,如痰,、支氣管灌洗液、血液,、腦脊液,、宮頸拭子、尿液,、胸腹水等均可,,起到盡早確診、減少傳染源的作用,。

      雖然PCR檢測結(jié)核菌DNA的方法較傳統(tǒng)方法對于結(jié)核病的盡早確診有了明顯的提高,,但該方法仍存在一定的局限性,主要表現(xiàn)為假陽性反應(yīng),主要原因有以下幾點:(1)痰液標(biāo)本成分復(fù)雜,,可能存在某種物質(zhì)干擾酶促反應(yīng)(2)結(jié)核分歧桿菌DNA提取純化方法復(fù)雜而影響其敏感性(2)實驗室污染可能影響特異性,。

      因此,在結(jié)核病的診斷上,,雖然檢測結(jié)核菌DNA的方法仍存在一定局限性,,但檢測時間短,與其他傳統(tǒng)方法結(jié)合可明顯提高檢測的敏感性和特異性,,為結(jié)核病的盡早確診提供了一種有效,、可行、簡便的方法,。

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